IL-1β和TNF-α与CML病程进展的关系研究

1 I-1β和TNF-α的产异常与CML的病程进程

　　量发现恶性造血细胞或白血病细胞均可以产IL-1霍奇金病瘤细胞株多发性骨髓瘤细胞幼年型慢性髓性白血病细胞（JCML）CML及急性髓系白血病细胞（AML）在CML白血病细胞及其骨髓基质细胞（主要是成纤维细胞）均可通过自分泌（指分泌细胞和靶细胞为同一细胞）旁分泌（指分泌细胞和靶细胞相邻）途径产量IL-1［12］而这些IL-1能直接或间接刺激CML祖细胞及干细胞恶性增殖

　　Estrov等［3］通过对CML加速期急变期以及对干扰素治疗耐药的CML患者发现其骨髓或外周血中低密度细胞（即白血病细胞）可产量的IL-1β而对干扰素敏感或慢性期的CML患者其IL-1β水平显著低下并且作者认为对干扰素耐药的CML患者较对干扰素敏感的患者预示病程在进展阶段从而提示IL-1β在CML病和进展中的作用表明IL-1β通过自分泌和旁分泌长刺激机制对CML克隆提供了一个局部长优势［1］

　　除CML加速期和急变期患者的白血病细胞可产量IL-1β外处于急变期的骨髓基质细胞也可产高水平的IL-1βWetzler等［2］通过培养CML骨髓基质细胞收集骨髓基质细胞培养上清测定IL-1β含量发现急变期CML基质细胞可分泌高水平的IL-1β而慢性期患者和正常基质细胞培养上清中IL-1β含量低于可检测的水平

　　IL-1β和IL-1RA（白细胞介素1受体拮抗剂）还与CML的存期及预后有关Wezler等［4］通过检测81例CML患者（63例为CML慢性期18例为CML加速期和急变期）白血病细胞中IL-1β及IL-1RA水平发现44例IL-1β含量高的CML患者，其存期均数为44个；明显低于37例IL-1β含量低的患者（其存期均数为58个月）；与IL-1β相反，IL-1RA含量高的CML患者比IL-1RA含量低的患者存期延长

　　此外，由CML白血病细胞及CML骨髓基质细胞产的量IL-1β，通过诱导GM-CSFG-CSFM-CSFIL-3TNF-α等［5］细胞因子的释放，上调白血病细胞膜表面造血刺激因子受体，并与上述细胞因子发协同作用，从而进一步刺激CML干／祖细胞的恶性增殖，加速病情恶化及病程转变

　　TNF-α作为一种重要的双向作用造血调控因子，它与CML的病程转变也有着密切的关系［6，7］Elbaz［6］检测了CML患者血清中TNF的含量，结果表明，处于加速期和急变期的CML血清TNF水平显著增高，慢性期患者血清TNF水平也较正常对照增高，治疗后达到缓解的患者血清TNF水平降至正常对照水平

　　在JCML，Freedman等［8］通过用JCML患者血浆或白血病细胞培养上清加到CML患者骨髓细胞中进行培养发现，上述血浆或培养上清能使CML白血病细胞显著长，用抗TNF-α单克隆抗体则可消除这种刺激作用，由此可以说明血浆或培养上清中刺激细胞增殖的因素主要是TNF-α

　　　　尽管TNF-α单独的效应往往能刺激造血干／祖细胞增殖，但却拥有很潜能的刺激活性Hoang等［10］报道TNF-α与GM-CSF协同作用明显增加ANLL（急性非淋巴细胞白血?img class="key2gif" src="http://www.yxsjy.net/upimg/keyimg/NTR5eHNqeTIzNDIz-20090323104923.png" />┑脑枷赴?img class="key2gif" src="http://www.yxsjy.net/upimg/keyimg/NTR5eHNqeTIzNDIz-20090323104923.png" />TNF-α还能上调GM-CSF和IL-3受体在白血病原始细胞上的表达，从而导致白血病细胞对刺激的敏感性增加；同时也可以解释TNF-α与GM-CSF或IL-3在体外协同刺激生长的机制此外，白血病细胞产生的TNF-α还可通过诱导骨髓基质细胞释放包括IL-1IL-6G-CSFGM-CSF在内的多种细胞因子，从而提供一个局部生长优势。

　　IFN-α在治疗CML中表现出多种生物活性包括直接抗增殖作用，通过调节细胞因子从造血细胞和基质细胞的释放等。Peschel等［11］观察了IFN-α对体内和体外CML细胞以及培养的骨髓基质细胞多种细胞因子表达的影响，结果发现，IFN-α可下调IL-1β和GM-CSF，但可上调IL-1RA。上述结果表明，IFN-α通过下调IL-1β和GM-CSF及上调IL-1RA，从而抑制CML恶性克隆增殖，发挥IFN-α的抗增殖作用。

　　2　CML治疗的新策略——白血病细胞及基质细胞自分泌和旁分泌生长刺激环的阻断

　　量结果表明，CML细胞及骨髓基质细胞自分泌与旁分泌生长刺激环的阻断可以阻止恶性细胞的增殖［3，12］。IL-1β受体拮抗剂（IL-1RA）是IL-1β的天然抑制剂，它通过与IL-1β受体特异结合而阻断IL-1β的生物活性，在此过程中IL-1RA并激活靶细胞。IL-1RA和可溶性IL-1β受体均能抑制CML恶性克隆的增殖，且呈剂量依赖性，但这种抑制作用可被IL-1β部分逆转。除IL-1RA和可溶性IL-1β受体外，抗IL-1β中和抗体也能抑制CML祖细胞的增殖［3］。

　　同样，在K562细胞系，IL-1RA也可抑制其DNA合成，并呈剂量依赖性。在IL-1RA浓度为10μg／L50μg／L和100μg／L时，其胸腺嘧啶核苷摄入分别降低40％50％和70％。但这种抑制效果同样可被IL-1β部分逆转［13］。IL-1RA对干扰素耐药的CML克隆形成细胞比对干扰素敏感的CML克隆形成细胞产生更加显著的抑制效果，这种抑制效果在缺乏外源性生长因子的条件下尤为突出。

　　在AML，IL-1RA还能抑制AML原始白血病细胞GM-CSF的自分泌［14］，但这种抑制效果也能被IL-1β部分逆转。zui近的还表明，IL-1RA还能增强阿糖胞苷（Ara-C）的细胞毒作用，IL-1RA以相加效应方式增强阿糖胞苷对AML原始集落形成细胞的抗增殖效果［15］。

　　此外，Estrov等［16］也了IL-4对CML祖细胞增殖的影响，结果发现，无论是单独应用胎牛血清还是添加IL-3或CM-CSF进行培养，IL-4均能抑制CML克隆的生长。进一步的发现IL-4抑制CML克隆增殖的作用是通过下调IL-1β所致，因而IL-4的抑制作用也能被IL-1β部分逆转。

　　除了具有上述拮抗IL-1β的作用外，IL-1RA还能反映CML治疗效果及病程进展。Aulitzky等［17］结果表明，对IFN治疗有效的CML患者，其血浆中IL-1RA水平较对IFN耐药的CML患者明显增高。在应用INF-α治疗或处理后，CML患者血清或骨髓细胞培养上清中IL-1RA水平显著增高，且在12h达高峰［11］。此外，在急性髓细胞白血病患者其白血病细胞可产生量IL-1，但IL-1RA却很少［14］。

　　除IL-1RA及IL-4对IL-1β具有抑制作用外，可溶性IL-1受体（sIL-1R）和IL-1转化酶抑制剂（IL-1convertingen-zymeinhibitors，ICE）均可抑制IL-1β的活性［18，19］。

　　上述量结果表明，IL-1RAIL-4可溶性IL-1受体及IL-1转化酶抑制剂均可抑制IL-1β活性，从而抑制CML恶性克隆增殖，因而为治疗CML提供了一种新的手段。IFN治疗CML的部分机制也在于阻断CML白血病细胞及其基质细胞自分泌和旁分泌生长刺激环，从而阻止CML白血病祖细胞的恶性增殖。