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抗体稀释液和ELISA相关溶液的配制
  • 发布日期:2010-02-21      浏览次数:4309
    • 上海联硕生物科技有限公司

      抗体稀释液和ELISA相关溶液的配制

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      1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS
        

       NaH2PO4·2H2O

      0.39

      Na2HPO4

      1.27

      NaCl

      0.85

      NaN3

      200mg

      H2O(蒸馏水)

      至    1000ml

      2ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液PH7.4PBST 

      NaCl

      2.0

      KH2PO4

      0.2

      Na2HPO4·12H2O

      2.9

      KCl

      0.2

      NaN3

      0.2

      H2O

      至    1000ml

      吐温(Tween20

      0.5ml

        4°C保存备用

      3、包被液(简称CBpH9.6  

      Na2CO3

      1.59

      NaHCO3

      2.93

      NaN3

      0.2

      H2O

      至    1000ml

        密封盖好,4°C存放备用

      4ELISA底物液(可溶性底物)
        

      磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0

       

      0.1mol/L柠檬酸(21.014/100ml)

      24.3ml

      0.2mol/L Na2 HPO428.4/1000ml)

      25.7ml

      H2O

      50ml

        4°C存放备用

      5DAB底物液(不溶性底物,组化病理等)
        

      0.05mol/L pH7.6  Tris-HCL

       

      Tris

      6.05

      HCL(36%)

      3.15克(约2.7mlHCL

      H2O

      至                            1000ml

      DAB3´3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色

      6DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色)
       DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。 73´3´5´5´-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制:
       用二甲基甲酰胺(dimethylformamideDMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用。使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。 

      81%离子琼脂胶配制液
          作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。
         0.05UpH8.6巴比妥钠-HCL缓冲液  

      巴比妥钠

      23.8

      1mol/L HCL

      34.5ml

      H2O

      2150ml


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