1、抗体或免疫球蛋白稀释液0.01mol/L pH7.2PBS NaH2PO4·2H2O | 0.39克 | Na2HPO4 | 1.27克 | NaCl | 0.85克 | NaN3 | 200mg | H2O(蒸馏水) | 至 1000ml | 2、ELISA洗液及HRP标记抗体稀释液PH7.4,PBST NaCl | 2.0克 | KH2PO4 | 0.2克 | Na2HPO4·12H2O | 2.9克 | KCl | 0.2克 | NaN3 | 0.2克 | H2O | 至 1000ml | 吐温(Tween)20 | 0.5ml | 4°C保存备用 | 3、包被液(简称CB)pH9.6 Na2CO3 | 1.59克 | NaHCO3 | 2.93克 | NaN3 | 0.2克 | H2O | 至 1000ml | 密封盖好,4°C存放备用 | 4、ELISA底物液(可溶性底物) 磷酸-柠檬酸缓冲液pH5.0 | | 0.1mol/L柠檬酸(21.014克/100ml) | 24.3ml | 0.2mol/L Na2 HPO4(28.4克/1000ml) | 25.7ml | H2O | 50ml | 4°C存放备用 | 5、DAB底物液(不溶性底物,组化病理等) 0.05mol/L pH7.6 Tris-HCL | | Tris | 6.05克 | HCL(36%) | 3.15克(约2.7ml浓HCL) | H2O | 至 1000ml | DAB为3´,3´二氧基联苯胺,不溶性底物,呈棕红色 | 6、DAB溶液配制:(组化及Western blot 显色) 称DAB30mg,用0.05mol/L pH7.6Trs-HCL缓冲液100ml溶解,如有沉淀,过滤后使用,一般新鲜配制使用。用前加入1%H2O2 1-1.5ml,H2O2浓度为0.01%,混均后使用。 7、3´,3´,5´,5´,-四甲基联苯胺(TMB)溶液配制: 用二甲基甲酰胺(dimethylformamide,DMF)或无水乙醇,将TMB配成1%浓度,4°C保存半年以内使用。使用前,用pH5.0磷酸-柠檬酸底物液9.9ml加入0.1ml(1mg/TMB)1%TMB液,再按每毫升TMB加入30%的H2O2 1ul,混匀后立即使用。2N H2SO4终止后,450nm测定OD值。 8、1%离子琼脂胶配制液 作免疫双相扩散,单相扩散及免疫电泳中使用。 0.05UpH8.6巴比妥钠-HCL缓冲液 巴比妥钠 | 23.8克 | 1mol/L HCL | 34.5ml | H2O | 2150ml | |