1、预处理
新超滤管:使用前用纯水浸泡,冰箱预冷10 min。然后将水倒出,置于冰上预冷2-5 min,加样。
旧超滤管:倒出管内的乙醇浸泡液,用纯水冲洗干净10遍(注意水流速尽量平缓,防止冲破滤膜),置于冰上预冷2-5 min,加样。
2、加样
如超滤管中有少许残留水可将超滤管内管倒置1000×g离心1 min,移液枪移取适量样本加入超滤管中。
3、离心
配平,12000 ×g离心(15-30 min),等达到目的转速后方可离开。
4、样本收集
外管滤液为除去部分蛋白的样本上清,如需取浓缩后样本用于其他实验,则另取外管,内管倒置,1000×g离心1-2 min。
5、超滤管清洗
使用完的超滤管用纯水反复清洗5次,再用75%乙醇冲洗3次。