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配置琼脂糖凝胶的方法
  • 发布日期:2024-01-29      浏览次数:557
    • 1.用于制备胶液的锥形瓶体积应为胶液体积的2-4倍,缓慢向缓冲液中加入琼脂糖,边加边搅拌,防止琼脂糖聚集。记录瓶体和溶液总重量。
      2.微波炉高火加热30s,根据配制的溶液体积调整加热时间。加热时间与微波炉、瓶体大小和琼脂糖浓度有关。
      3.摇匀琼脂糖溶液。
      4.再次高火加热30s,摇匀琼脂糖溶液。
      5.将溶液再次放回微波炉,高火加热至沸腾(大约10-35s)。接触移动时琼脂糖胶液可能会剧烈沸腾,小心操作,避免烫伤。从微波炉拿出后,室温冷却1-2min,轻轻摇晃使液体里的气泡溢出。
      6.重新放回微波炉,高火加热,使之沸腾约15s,观察琼脂糖的溶解状态,如果仍有颗粒存在,重复该步骤直至所有晶体全部溶解。
      7.待琼脂糖溶解成液体,重新称量总重量,计算蒸发液体量,用水补齐至原始重量,摇匀液体。
      8.建议胶液冷却至50-55℃时灌胶,有利于凝胶孔径均匀一致,不至于损伤制胶仪。灌胶前轻轻摇晃琼脂糖溶液,释放胶液中残存的气泡。
      9.向制胶槽中灌胶,一般胶的厚度3-5mm,灌胶后尽量排除梳孔之间或底部的气泡。
      10.在室温放置(30-45min)使胶充分凝结。

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