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凯氏定氮法
  • 发布日期:2011-12-23      浏览次数:1977
    •                                                                                凯氏定氮法

      凯氏定氮法是测定化合物或混合物中总氮量的一种方法。即在有催化剂的条件下,用浓硫酸消化样品将有机氮都转变成无机铵盐,然后在碱性条件下将铵盐转化为氨,随水蒸气馏出并为过量的酸液吸收,再以标准碱滴定,就可计算出样品中的氮量。由于蛋白质含氮量比较恒定,可由其氮量计算蛋白质含量,故此法是经典的蛋白质定量方法。

          凯氏定氮法是基于待测天然含氮有机物与浓硫酸共热时,会被氧化成为二氧化碳和水,
      然后碱化蒸馏使氨游离,用硼酸吸收后再以硫酸或盐酸标准溶液滴定,根据酸的消耗量乘以换算系数,即为蛋白质含量。   
      1. 有机物中的胺根在强热和CuSO4,浓H2SO4 作用下,硝化生成(NH42SO4
             反应式为:2NH2+H2S04+2H=(NH42S04 (其中CuSO4做催化剂)   
      2.在凯氏定氮器中与碱作用,通过蒸馏释放出NH3 ,收集于H3BO3 溶液中   
             反应式为:(NH42SO4+2NaOH=2NH3+2H2O+Na2SO4   
                       2NH3+4H3BO3=(NH4)2B4O7+5H2O   
          3. 用已知浓度的H2SO4(或HCI)标准溶液滴定,根据HCI消耗的量计算出氮的含量,然    后乘以相应的换算因子,既得蛋白质的含量   
             反应式为:(NH4)2B4O7+H2SO4+5H2O=(NH42SO4+4H3BO3   
                       (NH42B4O7+2HCl+5H2O=2NH4Cl+4H3BO3
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