作用:
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增强探针与靶核酸结合的机会,提高杂交信号。
但蛋白酶K浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时,都会对细胞结构有一定的破坏,导致组织切片脱落,细胞核的消失,从而影响杂交结果。
EDTA缓冲液可以代替蛋白酶K的作用,解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
保存方法:
保存在-20℃的冰箱里,避免反复冻融,有效保证12个月。
孵育温度为55-65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时,理想孵育时间为2小时