125I标记物的纯化

    125I标记物反应后，标记物需进行分离纯化以除去游离125I-和其他杂质。纯化标记物的方法有利用分子筛机制的凝胶过滤法、利用游离125I-与标记物分子极性差异进行吸附解离的离子交换层析法、按分子所带电荷和直径不同在电场作用下分子迁移速率不同进行分离纯化的聚丙烯酰胺凝胶电泳法（PAGE）以及液相色谱法（HPLC）。

    以葡聚糖凝胶（如SephadexG-50）柱层析分离纯化125I标记物为例：标记反应混合液经柱层析时，需定时或定量逐管收集层析洗脱液，并用丁计数仪测定每管的放射性强度。通常zui先洗脱出的为聚合物杂质放射峰，然后为含标记物的主放射峰，随后即为游离125I-峰。

125I-标记物柱层析分离纯化示意图

Ⅰ．损伤和聚合标记物；Ⅱ．125I标记物；Ⅲ．游离125I-

    标记物贮存一段时间后可因脱碘和自身辐射造成蛋白质破坏形成碎片，因而需对标记物重新纯化。

上海联硕生物科技有限公司提供

+86- 55785281