胎牛血清是母牛在怀孕五至八月龄胎时,将胎牛取出并进行心脏穿刺取血。穿刺取血可较大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是从刚出生到2周内的新生牛静脉采血。和新生牛血清相比,胎牛血清显然产量低,成本高。
胎牛血清应用在哺乳动物细胞培养中;因此,胎牛血清应用很广泛。比如,胎牛血清能够用在科研、工业生产、人兽疫苗生产的质量控制及生物技术药物的质量控制领域。
真正胎牛血清的生产工艺流程有哪些呢?
胎牛血清主要步骤:
1.固定和麻醉
胎牛原血清采集的关键技术主要是怀孕母牛的剖腹产和太牛的全封闭无菌心脏穿刺采血,对怀孕8个月左右的母牛进行剖腹产,产前采用侧卧保定方法固定。麻醉采取全身麻醉和术部局部麻醉相结合的方法,确实有效的麻醉师顺利进行剖腹产的重要保障。
2.母牛剖腹,心脏穿刺
手术切口位置选择在左肷窝腹壁的上三分之一处,优点是靠近子宫角便于手术中缝合快速收缩的子宫,其次是内容物不易流入腹腔,减少腹腔被污染而带来腹,盆两腔感染引发生殖系统器质性病变的风险。因子宫收缩极快,故在胎牛取出的同时要快速缝合,然后进行心脏穿刺采血。
3.原血采集
采血前器具全部消毒,探明胎牛心脏搏动明显部位,消毒后针管垂直穿刺心脏采血。
4.冷冻离心
将原血尽快放入冷冻离心机中3400r/min ,30min。收集血清,冻存。
5. 成品生产和定级
首先做好原血清解冻工作,26℃热风均匀循环解冻然后0.1μm三次过滤,避免病原微生物的污染。此过程会对血清检测和定级。全程在万级到十万级净化车间完成。全程做好记录,包括母牛资料,生产过程记录和每只胎牛血清数量 以及容器编号。方便检测和血清溯源。
6. 分装贴标保存
成品血清分装贴标后需迅速储存在-20℃以下快速冷冻24小时以上。
胎牛血清为制品,不含任何人为的添加成分,可应用于各种常规的细胞培养,特别适合于一些要求较高的细胞的培养,为细胞提供必须的营养物质和多种生长因子,有效促进细胞生长。
胎牛血清是一种性状、外观 浅黄色澄清、无溶血、无异物稍粘稠液体。市场上出现各类牛血清,索莱宝教大家怎么根据不同细胞选择胎牛血清。小牛血清,新生牛血清,胎牛血清三者的成分基本没区别,三者是依据采集的牛龄的不同来命名。胎牛是还未接触外界世界的母牛体内的牛,所以胎牛血清的免疫球蛋白含量应该是极少的,血清比较纯,培养细胞的效果较佳。依次是新生牛,再次是小牛。