在细胞培养过程中，经常加入5%-20%的胎牛血清，最常使用的Gibco澳洲优级胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱，影响后续实验的结果，我们在实验中使用10%的胎牛血清培养293T细胞，效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Hyclone FBS或者20%的Gibco澳洲优级胎牛血清，要根据具体细胞选择合适的胎牛血清浓度。

 

　　Gibco澳洲优级胎牛血清保存方法：

　　1、需要长期保存的血清必须储存于-20℃-70℃ 低温冰箱中。4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月。切勿将血清在37℃放置太久，否则血清会变得浑浊，同时血清中的有效成分会被破坏，而影响血清质量。如果一次无法用完一瓶，可将40～45ml分装于无菌50ml离心管中。由于血清结冰时体积会增加约10%，因此，血清在冻入低温冰箱前，必须预留一定体积空间，否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。

　　2、一般厂商提供的血清为无菌，无需再过滤除菌。如发现牛血清有悬浮物，则可将牛血清加入培养液内一起过滤，切勿直接过滤牛血清。

　　3、瓶装Gibco澳洲优级胎牛血清解冻需采用逐步解冻法：-20℃至-70℃ 低温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天。然后移入室温，待全部溶解后再分装，一般以50ml无菌离心管可分装40～45ml。在溶解过程中须规则摇晃均匀，使温度与成分均一，减少沈淀的发生。切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

　　4、热灭活是指56℃，30分钟加热已*解冻的血清。加热过程中须规则摇晃均匀。此热处理的目的是使血清中的补体成分灭活。除非必须，一般不建议作此热处理，因为热处理会造成血清沉淀物显着增多，而且还会影响血清的质量。补体参与反应有：细胞毒作用，平滑肌细胞收缩，肥大细胞和血小板释放组胺，增强吞噬作用，促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。

　　5、血清中的沉淀物絮状物：主要是牛血清中的脂蛋白变性及解冻后牛血清中纤维蛋白造成，这些絮状物不会影响血清本身的质量。可用离心3000rpm，5分钟去除，也可不用处理。显微镜下"小黑点"：经过热处理过的血清，沉淀物的形成会显着增多。有些沉淀物在显微镜下观察象"小黑点"，常误认为血清受污染。一般情况下，此小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清质量，则应立即停止使用，更换另一批号的血清。