一、什么是蛋白酶K?
蛋白酶K(Proteinase K)是一种非特异性、枯草杆菌蛋白酶相关的丝氨酸蛋白酶,基因序列来源于白色念球菌白色念球菌(Tritirachium album limber),具有很高的比活性。用于mRNA和DNA与蛋白质的分离。
二、它有什么作用?
蛋白酶K在原位杂交技术中通常用于杂交前的处理,它具有消化包围靶DNA蛋白质的作用,以增加探针与靶核酸结合的机会提高杂交信号。但蛋白酶K的浓度过高、消化时间过长或孵育温度过高时都会对细胞的结构有一定的破坏,导致组织切片的脱落细胞核的消失,从而影响杂交结果。EDTA缓冲液可以替代蛋白酶K的作用解决上述出现的问题,并能达到理想的染色效果。
三、他的用途及应用
1.蛋白酶K可用于质粒或基因组DNA、RNA的分离,是DNA提取的重要试剂;
2.对于xg病毒亦可裂解病毒释放核酸,消除核酸分解酶(RNase)以防止病毒的RNA降解。并且可以灭活病毒,让病毒的蛋白变性,失去活性而“死掉”,不再有传染性,提高运输和检测阶段的安全性;
3.同时蛋白酶K也能够应用到皮革工业、肉类嫩化、灭活生活以及工业用水中的细菌,优点是消毒剂本身无害,而且不产生有害消毒产物,所以这是一种高效环保的方法。
四、如何存放
保存:保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融,有效保证12月。
使用方法:孵育温度为55至65℃,理想孵育温度为58℃,孵育时间为15分钟至48小时;理想孵育时间为2小时。
货号 | 名称 | 品牌 | 规格/纯度 |
AS70874 | 蛋白酶K | AMEKO | 30u/mg |
RC21066 | 蛋白酶K溶液 | AMEKO | 20mg/ml |
RC21328 | 蛋白酶K缓冲液 | AMEKO | 100mL |
1245680100 | 蛋白酶K | Merck | 40u/mg |