一旦您在细胞培育的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培育基是否混浊,然后,在镜下观察培育细胞生长的 状态,黑点是否游动。假如细胞被污染,微生物则会大量繁衍,培育基就会迅速变黄、变混浊。污染包含细菌污染、 支原体污染等。
假如在镜下观察细胞,生长状态良好,与黑点呈现前相比。没有任何变化,那么,黑点的呈现可能与以下几种状况有关:
1、细胞生长过老,破碎的细胞残骸;
2、血清质量不好,反复冻融的成果;
3、制造培育基的pH值偏高,不宜细胞生长;
4、制造培育基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;
5、培育原代细胞中呈现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
细胞培育中怎么防止黑点生成?
1、尽可能地减少血清冻融次数。
2、培育基无需37℃水浴。
3、培育基坚持*佳PH值7.0- 7.2。
4、严格控制制造培育基的水质,容器定时刷洗。
5、掌握细胞传代的*佳时机,细胞切勿生长过老。