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详细解析糖原合成酶激酶(GSK3β)抗体的操作步骤
  • 发布日期:2019-11-25      浏览次数:1363
    •    糖原合成酶激酶(GSK3β)抗体是用于测定人血清、血浆及相关液体样本中糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)含量。
       
        糖原合成酶激酶(GSK3β)抗体的操作步骤:
        1、从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。
        2、设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL;
        3、样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。
        4、除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。
        5、弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次。
        6、每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。
        7、每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。
       
        1、严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。
        2、洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。
        3、消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。
        4、底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。
        5、避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。
        6、在储存和温育时避免强光直接照射。
        7、平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。
        8、任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。
        9、不能使用过期产品。
        10、如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。
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