试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验（ELISA）。往预先包被人糖原合成酶激酶3β（GSK3β）捕获抗体的包被微孔中，依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体，经过温育并*洗涤。用底物TMB显色，TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人糖原合成酶激酶3β（GSK3β）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。

 

　　糖原合成酶激酶（GSK3β）抗体的性能特点：

　　1、检测范围：0.25ng/mL–8ng/mL。

　　2、灵敏度：低检测浓度小于0.1ng/mL。

　　3、特异性：不与其它可溶性结构类似物交叉反应。

　　4、重复性：板内变异系数小于10%，板间变异系数小于15%。

 

　　样本处理及要求：

　　1、血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　2、血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2-8°C1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。

　　3、组织匀浆：用预冷的PBS(0.01M,pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。

　　4、细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。