择一抗宿主物种
通常，当使用偶联二抗检测未偶联一抗时，产生抗体的宿主动物物种就显得非常重要。对于免疫组织化学，产生一抗的物种应尽可能与样品物种不同。这是为了避免抗免疫球蛋白的二抗与样品中的内源性免疫球蛋白间发生潜在交叉反应性。更为恰当的选择是来源于兔的一抗，然后是偶联于检测分子的抗兔IgG二抗。如果可提供偶联一抗，则可避免此问题。对于使用不包含内源性免疫球蛋白的样品的其它技术，宿主物种的选择则不那么重要。
组织裂解物和组织培养物上清液包含免疫球蛋白。对还原、变性样品进行蛋白质印迹时，IgG会以50和25kDa的条带显现，这两个条带分别对应于IgG分子的重链和轻链。
选择二抗
二抗应来源于与所使用一抗相同的物种。例如，如果您的一抗为小鼠单克隆抗体，那么就需选抗小鼠二抗。我们推荐您查看二抗的数据表以确保它已在您将要使用的应用中进行了测试。
抗体数据表列出了已经过测试并证明行之有效的应用。如果未列出某项应用，并不表示该抗体不适于该应用。它只是表示尚未经过测试并且抗体表现如何未知。当应用已经过测试并证明无效时，数据表上会加以说明。
